口臭軽減プロバイオティクス

1. 製品紹介

製品名: オーラルフレーバープロバイオティクスパウダー
商品仕様：2g*30個/箱
適応症: この製品が提供する菌株組成物は、口臭の原因となる主要な病原性細菌の増殖を阻害し、口臭の症状を効果的に軽減します。
使用方法: 1日3回、毎回1錠ずつ。 食後に直接乾燥粉末を経口摂取することをお勧めします。 慢性的な口臭がある人は、息が爽やかになるまで長期間服用する必要があります。
保存方法：涼しい場所、できれば冷蔵4度で保存してください。
生菌数: プロバイオティクス混合物 (500 億 CFU/g)、バチルス コアギュランス PB-BC 02 (200 億 CFU/g)、ラクトバチルス サリバリウス HH-LS 17 (300 億 CFU/g)。
その他の成分: ソルビトール 200mg、クエン酸 200mg、ペパーミントパウダー 200mg、ビタミン C 200mg、フラクトオリゴ糖 100mg、ガラクトオリゴ糖 200mg、スクラロース 100mg、食品フレーバー 100mg。

2. 病因

口腔フローラは口腔粘膜バリアと免疫反応の重要な要素であり、病原体の侵入に抵抗し、口腔疾患を予防および治療することができます。 口腔の微生態学的バランスが崩れると、口腔粘膜バリアが破壊され、臭気を発生する細菌が定着する条件が提供され、口臭などの口腔疾患が引き起こされる可能性があります。 口腔口臭 (IOH) は口臭の 80% ～ 90% を占め、主に口腔微生物による揮発性硫黄化合物の生成によって引き起こされます。 Fusobacterium nucleatum は、口腔内の硫黄含有基質を揮発性硫黄化合物に分解することができます。 揮発性硫黄化合物 (VSC) およびその代謝物は、口臭の原因となるスカトール、カダベリン、インドール、プトレシンなどの物質も生成する可能性があります。
現在、従来の口臭治療には、機械的除去（歯磨き、舌こすりなど）、化学療法（クロルヘキシジンうがい薬、チューインガムなど）、漢方薬や天然物（茶ポリフェノール）の使用などが主に含まれています。 、ビタミンC、カテキンなど）。 従来の治療法は効果が短期間であり、長期間使用すると口腔内細菌叢のアンバランスを引き起こす可能性があります。 プロバイオティクスは口腔内細菌叢を根から調整し、臭いを生み出す細菌の増殖を抑制します。 したがって、口臭を治療するためのプロバイオティクスの使用は、徐々に研究のホットスポットになってきています。

3. プロバイオティクスによる口臭改善のメカニズム

虫歯や歯周炎などの微生物が原因の病気と同様、口臭もそれに関連する原因菌を標的とすることで微生物的に治療できます。 プロバイオティクスは、口腔病原性細菌の増殖を阻害し、口腔内細菌叢を調節し、口腔微生物生態学の健康を維持します。 プロバイオティクスが機能する主なメカニズムには、次の側面が含まれます: (1) 結合部位をめぐって競合し、病原性細菌の定着を減少させ、病原性細菌と共凝集します。 ; (2) 栄養素や成長因子を奪い合い、抗菌物質を生成する。 (3) 宿主の免疫応答を強化し、病原体によって誘導される炎症誘発性サイトカインの産生を阻害します。

4.口臭を改善するHehe Biotechのプロバイオティクス

バチルス・コアギュランスの菌株番号はPB-BC02、名称はバチルス・コアギュランスです。 これは、中国の武漢にある武漢大学の中国活字文化コレクションセンターに寄託されています。 寄託日は 2018 年 12 月 12 日です。寄託番号は CCTCC NO: M2018889 です。

5. 口臭改善効果の評価

この研究では、最初に、Fusobacterium nucleatum による H2S の生成を阻害するプロバイオティクスの能力を評価することによって 5 つのプロバイオティクス株をスクリーニングし、さらに Fusobacterium による揮発性硫化物化合物 (VSC) およびバイオフィルムの生成を阻害する 5 つのプロバイオティクス株の能力を評価しました。核。 バチルス・コアギュランス PB-BC 02 とラクトバチルス・サリバリウス HH-LS 17 は、優れた in vitro 効果を持つ 2 つのプロバイオティクス株でした。 最後に、Fusobacterium nucleatum の増殖に対する単一株プロバイオティクスと複合プロバイオティクスの阻害率を比較しました。 その結果、複合体プロバイオティクスのフソバクテリウム・ヌクレアタム増殖抑制効果は単一細菌よりも優れていることが示され、バチルス・コアギュランス PB-BC 02 とラクトバチルス・サリバリウス HH-LS 17 の組み合わせが口臭を改善する効果があることが示されました。 。 試験方法と結果は以下のとおりです。

5.1 Fusobacterium nucleatum による H2S 生成を阻害するプロバイオティクスの能力

試験原理: H2S と FeSO4 の反応により黒色硫化第一鉄 FeS 沈殿物が生成され、さまざまなプロバイオティクスが Fusobacterium nucleatum による H2S 生成を阻害する能力を評価するために使用されます。
具体的な操作: 硫酸第一鉄とチオ硫酸ナトリウムの溶液を作成し、{{0}}.22 μm の滅菌フィルター膜でろ過し、BHI 培地に加えて硫酸第一鉄とチオ硫酸ナトリウムの最終濃度を調整します。チオ硫酸ナトリウム｛｛４｝．２％およびチオ硫酸塩０．３％を加えた後、２％１０９ＣＦＵ／ｍＬのフソバクテリウム・ヌクレアタム菌懸濁液を添加し、続いて５％プロバイオティック菌液を添加し、３７度で３６時間嫌気培養した。
試験結果: 発生した降水量に基づいてスクリーニングします。 「－」は沈殿がないことを意味し、プロバイオティクスがFusobacterium nucleatumに対して強い阻害能力を有することを示している。 「+」は降水量が少なく、「++」は降水量が多く、「+++」は沈殿物が多くなります。 結果を表１に示す。プロバイオティクス３１株中、沈殿が少ないのが１１株、沈殿が多いのが８株、沈殿の多い株が７株、及び５株（ラクトバチルス・アシドフィルスＨＨ－ＬＡ２６、ラクトバチルス・パラカゼイ）であった。 HH-LP58、ラクトバチルス・サリバリウス HH-LS17、ラクトバチルス・ビフィダムHH-BL18およびバチルス・コアギュランスPB-BC02）は沈殿を示さず、口臭を改善する可能性があることを示しています。

表 1 31 種類のプロバイオティクス株の Fusobacterium nucleatum による H2S 生成を阻害する能力

5.2 Fusobacterium nucleatum による揮発性硫黄化合物 (VSC) の生成を阻害するプロバイオティクスの能力

試験方法: 最初に、Fusobacterium nucleatum による H2S 生成を阻害する能力に基づいて 5 つのプロバイオティクス株をスクリーニングし、Fusobacterium nucleatum によって生成される VSC を Halimeter 機器を使用してさらに定量しました。 合計２ｍＬの１０７ＣＦＵ／ｍＬのフソバクテリウム・ヌクレアタム細菌懸濁液および１５％（ｖ／ｖ）プロバイオティック細菌溶液をフンゲート試験管に加えた。 9時間の共培養後、Fusobacterium nucleatumの生産を阻害するプロバイオティクスの能力を測定しました。 VSC の機能。
テスト結果: VSC は口臭の主な原因です。 口臭の程度を反映するだけでなく、歯肉組織へのダメージも反映するため、非常に重要な指標となります。 Fusobacterium nucleatumが生産するVSCの予備スクリーニングで得られた5株の阻害率を測定することにより、さらに菌株をスクリーニングした。 結果を表２に示す。このうち、３株の抑制能が８０％を超え、２株の抑制率が８０％を超えた。 70%未満。 したがって、ラクトバチルス・サリバリウス HH-LS17、ラクトバチルス・ビフィダス・ロンガム HH-BL18、およびバチルス・コアギュランス PB-BC02 を含む 3 つのプロバイオティクス株を選択して、フソバクテリウム・ヌクレアタムのバイオフィルム形成に対するそれらの効果を研究しました。

表 2 Fusobacterium nucleatum による VSC 生産に対するプロバイオティクスの影響

5.3 プロバイオティクスが Fusobacterium nucleatum バイオフィルム形成を阻害する能力

試験方法：Fusobacterium nucleatumの菌濃度を107 CFU/mLに調整し、9時間放置します。 次に、それを 96- ウェルプレートに追加します。 Fusobacterium 凝集細菌懸濁液 180 μL とプロバイオティクス細菌溶液 20 μL を各ウェルに追加します。 37 48 時間培養。 陰性対照群では、プロバイオティック液体の代わりに同量のMRS培地を添加し、ブランク対照では、プロバイオティック液体の代わりに同量のBHIを添加した。 インキュベーション後、PBS バッファーで 2 回洗浄し、99% メタノールで 15 分間固定し、上清を捨て、室温で乾燥させます。 乾燥終了後、0.1% クリスタルバイオレット溶液 100 μL を各ウェルに加え、5 分間染色し、染色後滅菌水で 2 回洗浄し、完全に乾燥するまで室温に置きます。 最後に、33% 酢酸溶液 200 μL を加えて溶解します。 ピペットで混合した後、各ウェルから 175 μL をピペットで取り、新しい 96- ウェル プレートに加え、マイクロプレート リーダーで 570 nm の吸光度の値を読み取ります。 バイオフィルムによる減少の計算方法は、阻害率（％）｛｛１９｝（ネガティブコントロールバイオフィルム−上清介在バイオフィルム量）／ネガティブコントロールバイオフィルムである。
テスト結果: 歯周ポケットと舌苔は、VSC やその他の臭気分子を生成する細菌にとって理想的な増殖環境を提供するため、口臭の危険因子です。 微生物は通常、歯周ポケットや舌苔にバイオフィルムの形で存在します。 Fusobacterium nucleatum は、歯垢の形成における中間架橋細菌として機能します。 バイオフィルムの形成が口臭の原因となります。 したがって、そのバイオフィルムを抑制することは、口臭を軽減するための重要なステップです。 可能性が提供されます。 クリスタルバイオレット染色法を使用して、フソバクテリウム・ヌクレアタムによるバイオフィルムの形成を阻害するラクトバチルス属の能力を測定した。 結果を表３に示す。５％プロバイオティクス細菌溶液を添加した場合、バチルス・コアギュランスＰＢ－ＢＣ０２およびラクトバチルス・サリバリウスＨＨ－ＬＳ１７が最も優れた阻害効果を示し、３５％を超えた。 Fusobacterium nucleatum による VSC およびバイオフィルムの生成を阻害する結果に基づいて、Bacillus coagulans PB-BC 02 および Lactobacillus salivarius HH-LS 17 は、より優れた in vitro 効果を示します。 次に、Fusobacterium nucleatum の増殖に対するそれらの効果を評価します。

表 3 Fusobacterium nucleatum バイオフィルムに対するプロバイオティクスの阻害効果

5.4 Fusobacterium nucleatum の増殖に対するプロバイオティクスの影響

試験方法: 96- ウェルプレートの各ウェルに 107 CFU/mL の Fusobacterium nucleatum 細菌懸濁液 190 μL を加え、次にプロバイオティクス細菌溶液 10 μL を加え、37 度で嫌気的に培養し、3 回ごとに 600 nm でモニタリングします。時間。 吸光度を測定し、増殖曲線を描きます。
検査結果: 口腔疾患の多くは口腔内細菌叢のアンバランスによって引き起こされます。 特定の抗菌能力は、プロバイオティクスが口腔内細菌叢を調節するのに役立ちます。 結果を図 1 に示します。 Fusobacterium nucleatum に対するプロバイオティクスの阻害効果は、複合プロバイオティクス > Lactobacillus salivarius HH-LS 17 > Bacillus coagulans PB-BC 02 > MRS 培地対照群の順であり、両株のプロバイオティクスが抑制効果があることを示しています。 Fusobacterium nucleatum の増殖を阻害することができ、2 つの菌株を混合すると Fusobacterium nucleatum に対してより優れた阻害効果が得られます。

図 1 Fusobacterium nucleatum の増殖に対するプロバイオティクスの効果

要約すると、Bacillus coagulans PB-BC 02 および Lactobacillus salivarius HH-LS 17 は、Fusobacterium nucleatum による H2S、VSC、およびバイオフィルムの生成を阻害することができ、配合後の Fusobacterium nucleatum の増殖を阻害する能力は、単一株の場合よりも強力です。これは、バチルス・コアギュランス PB-BC 02 とラクトバチルス・サリバリウス HH-LS 17 の組み合わせが口臭を改善できることを示しています。

参考文献:

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